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高雄林園地區水產養殖用水致病菌檢測及益生菌應用之研究

為了解決宜蘭斑節蝦養殖場的問題，作者巫宗憲 這樣論述：

目 錄誌謝 -------------------------------------------------------------- i中文摘要 -------------------------------------------------------------- ii英文摘要 -------------------------------------------------------------- iv目錄 -------------------------------------------------------------- vi表目錄 ------

-------------------------------------------------------- vii圖目錄 -------------------------------------------------------------- viii第一章 緒論----------------------------------------------------------- 1 第一節 研究緣起------------------------------------------------------- 1 第二節 研究目的-------------------

------------------------------------ 2 第三節 研究架構------------------------------------------------------- 3第二章 文獻探討------------------------------------------------------- 4第一節 水產養殖概況---------------------------------------------------- 4第二節 水產養殖危害菌種-----------------------------------------------

- 8第三節 分子生物技術用於微生物鑑定--------------------------------------- 16一 Ribosomal DNA------------------------------------------------- 16二 聚合酶連鎖反應-------------------------------------------------- 16三 定序----------------------------------------------------------- 17第四節 益生菌應用------------------------

------------------------------ 18第三章 研究方法-------------------------------------------------------- 20第一節 收集水源來源---------------------------------------------------- 20第二節 水質分析項目---------------------------------------------------- 20第三節 分子生物實驗----------------------------------------------------

22一 細菌培養-------------------------------------------------------- 22二 DNA萃取-------------------------------------------------------- 24三 PCR實驗-------------------------------------------------------- 25四 瓊脂凝膠電泳實驗------------------------------------------------ 27五 PCR產物純化--------------------

--------------------------------- 28六 抑菌實驗-------------------------------------------------------- 29第三節 實驗儀器設備---------------------------------------------------- 30第四章 結果與討論------------------------------------------------------ 31第一節 水質分析結果--------------------------------------------------

-- 31第二節 分子生物實驗結果------------------------------------------------ 36第三節 抑菌實驗結果---------------------------------------------------- 42第四節 討論----------------------------------------------------------- 46第五章 結論----------------------------------------------------------- 49參考文獻 ----------------

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人類致病性弧菌在台灣水產養殖環境中變化之研究

為了解決宜蘭斑節蝦養殖場的問題，作者戴耀賢 這樣論述：

腸炎弧菌是台灣發生率最高的食品中毒細菌，透過海產感染人類。為了確實掌握風險，美國制訂出「貝類中腸炎弧菌風險評估」文件，分為收穫、收穫後與公共衛生等模組，收穫模組是建立在確實的養殖環境中環境因子變化與腸炎弧菌數量變化等數據。除了腸炎弧菌外，霍亂弧菌和創傷弧菌亦是養殖環境中常見的人類致病菌。本研究在不同季節 (3月、6月、9月及12月)分別採取各兩池的石斑魚、虱目魚和吳郭魚魚塭採樣分析，分別為鹹水、鹹淡水、淡水等不同環境，鑑定這三種嗜鹽性不同的腸炎弧菌、霍亂弧菌和創傷弧菌數量變化並著重於分析腸炎弧菌與環境理化因子或衛生指標菌之間的關連性。此外，本研究也分析了所採得腸炎弧菌菌株之毒性基因多型性、血

緣關係及抗藥性等特性。結果顯示，在六個採樣魚塭當中高雄永安石斑魚塭出現最高的腸炎弧菌菌數、永安的虱目魚塭也出現最多的霍亂弧菌菌數以及最多的創傷弧菌分離株。統計分析顯示溫度對於腸炎弧菌數量有顯著相關；溫度對菌數呈現正相關而鹽度以及溶氧則是負相關。各魚塭之腸炎弧菌抗藥性分析並沒有顯著差異。以Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) 技術分析採樣所得之腸炎弧菌菌株，發現各魚塭之腸炎弧菌並沒有明顯差異。在毒性基因多形性分析中，四季的採樣中共獲得兩株致病性腸炎弧菌菌珠，分別是SCS1112-1和SCS1112-2。這兩株菌分別帶有vcrD1、vopD2、vopP及v

crD1、vopD2、vopB2、vopP、vopC致病相關基因。MTase及其他它致病相關基因也出現在一些環境菌株中，可能是臨床與環境菌株之間的水平基因轉移有關。此結果與之前相關研究類似，但須與第二年度採樣數據做整合，結果可作風險管理或養殖衛生管理參考。