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評估NKX6.1作為大腸直腸癌DNA甲基化生物標記之潛力與對於腫瘤發生、轉移和抗藥性之影響

為了解決krex plus的問題，作者鍾新華 這樣論述：

大腸直腸癌 (Colorectal cancer, CRC) 是繼肺癌之後，發病率全球第二位，死亡率全球第四位的癌症。由於分子異質性，即使在相同階段的患者中也觀察到臨床上的差異。因此，迫切需要用於預測大腸直腸癌患者預後的生物標記 (biomarker)。先前我們的研究已證實NKX6.1甲基化 (methylation) 較高的II期大腸直腸癌患者的5年總體生存期 (overall survival) 較差。但是，僅以NK6 homeobox 1 (NKX6.1) 為偵測方式的靈敏度 (sensitivity) 僅有23％。因此，我們的目標是以NKX6.1聯結另外三個基因：LIM homeob

ox transcription factor 1α (LMX1A)、sex-determining region Y-box 1 (SOX1) 和zinc finger protein 177 (ZNF177) 以提高預後性 (prognostic)。通過定量甲基化分析 (Quantitative-Methylation specific PCR, Q-MSP)，我們發現LMX1A、SOX1和ZNF177在大腸直腸癌組織中高度甲基化。聯結四個基因組合的分析，顯示有最佳的靈敏度和特異性 (specificity)。此外，四基因甲基化組合中，甲基化較高的患者，其5年總體生存期及無病生存期 (di

sease-free survival)較差。這些結果表明，偵測NKX6.1、LMX1A、SOX1和ZNF177甲基化程度的組合，對於大腸直腸癌是一種新型的預後指標及生物標記。然而，NKX6.1在大腸直腸腫瘤發生 (tumorigenesis) 的生物學功能仍不清楚。在這項研究中，我們證明NKX6.1在體外和體內均可抑制腫瘤發生和轉移 (metastasis)。NKX6.1部分通過調節上皮細胞間質轉換 (epithelial-to-mesenchymal transition, EMT) 以達到抑制腫瘤細胞的侵襲 (invasion)。此外，我們發現外源表現NKX6.1的大腸直腸癌細胞，會提高

其對化療藥物敏感性 (chemosensitivity)。為了進一步探討NKX6.1抑癌的機轉及上下游的調控，我們使用了RNA定序 (RNA sequencing) 進行基因富集分析 (enrichment assay)。結果顯示，差異表達基因 (differentially expressed genes, DEGs) 主要與cell migration、response to drug、transcription factor activity及growth factor activity有關，表明這些DEGs參與了NKX6.1抑制腫瘤侵襲和轉移的功能。我們的結果顯示，NKX6.1通過部分

抑制EMT並提高大腸直腸癌細胞的化療敏感性來達到抑癌作用，因此我們認為NKX6.1為潛在的治療靶標。

探討compound A對於惡性膠質瘤細胞株U87的影響

為了解決krex plus的問題，作者徐煒倫 這樣論述：

目 錄致謝……………………………………………………………………i中文摘要………………………………………………………………ii英文摘要………………………………………………………………iii目錄……………………………………………………………………iv第一章 緒論……………………………………………………………1第一節、惡性膠質瘤 (Glioblastoma)…………………………………………1第二節、細胞週期 (Cell Cycle)………………………………………………3第三節、上皮細胞間質轉化(Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT)……5第四節、癌症幹細胞（

Cancer Stem Cell，CSC）……………………………6第五節、細胞自噬(Autophagy)與細胞凋亡(Apoptosis)………………………7第六節、化合物A (Compound A)簡介…………………………………………9第七節、研究動機與目的……………………………………………………10第二章 材料與方法第一節、實驗材料……………………………………………………………12第二節、實驗方法…………………………………………………………..…22第三章 實驗結果第一節、Compound A可以抑制U87細胞株的生長……………………….29第二節、探討Compound A對於U87細胞株的

cell cycle的影響…29第三節、Compound A對U87細胞株的移動能力影響（Wound healing, Transwell assay，EMT marker分析)………………………………………30第四節、 Compound A可以影響U87細胞株的聚球能力……………………30第五節、Compound A可以影響癌症幹細胞相關基因……………………31第六節、Compound A可以誘導U87細胞株產生凋亡與自噬現象…………32 第七節、Compound A所誘導U87細胞株產生的自噬現象會促進細胞凋亡………………………………………………………………………………..33第八節

、探討Compound A在U87細胞株中作用所引發的訊號途徑………………………………………………………………………………34第四章 實驗討論……………………………………………………..37第五章 參考文獻……………………………………………………..41第六章 實驗結果圖表………………………………………………49第七章 附錄…………………………………………………………76